Improvement of bovine in vitro embryo production by fetal calf serum and cysteamine supplementation and investigation of freezability

Abstract

Abstract: The aim of this study was to investigate the effects of cysteamine (Cys) and fetal calf serum (FCS) in synthetic oviduct fluid (SOF) and charles and rosenkrans (CR1aa) on the bovine in vitro embryo production and its ability of freeze. The oocytes were divided into two groups and allowed to mature in TCM-199, with and without cysteamine. They were divided into 4 subgroups according to whether they contain Cys and FCS in 2 different culture media (SOF and CR1aa). Accordingly, 8 groups were formed as SOF+FCS+Cys, SOF+Cys, SOF+FCS, SOF, CR1aa+FCS+Cys, CR1aa+Cys, CR1aa+FCS and CR1aa. Embryos were cultured for 7- 9 days and were frozen using vitrification method. Development of embryos was observed during the first 24 hr post-thaw period. The highest rate of compact morula was 20% in SOF+FCS+Cys and 19.4% in CR1aa+FCS+Cys. The rate of blastocyst in SOF+FCS and CR1aa+FCS were found 17.9% and 15.4% respectively and the difference between groups was statistically significant (P<0.05). During the 12 hr vitality assessment, the highest rate was determined in SOF+FCS (47%). The results indicate that FCS has a positive effect in reaching compact morula and blastocyst regardless of the presence of the culture medium or antioxidant used. There was no statistically difference between the values of post-thaw embryos.

Özet: Bu çalışmanın amacı, sisteamin (Cys) ve fetal buzağı serumu (FCS)’nun sentetik oviduct sıvısı (SOF) ve charles ve rosenkrans (CR1aa) medyumlarında in vitro sığır embriyo üretimi ve donma kabiliyeti üzerindeki etkilerini araştırmaktır. Toplanan oositler iki gruba ayrıldı ve sisteaminli ve sisteaminsiz TCM-199 medyumunda maturasyonuna izin verildi. 2 farklı medyumda (SOF ve CR1aa) kültüre edilmek üzere Cys ve FCS içerip içermediklerine göre 4 alt gruba ayrıldı. Buna göre 8 alt grup; SOF+FCS+Cys, SOF+Cys, SOF+FCS, SOF, CR1aa+FCS+Cys, CR1aa+Cys, CR1aa+FCS ve CR1aa olarak oluşturuldu. Embriyolar 7-9 gün boyunca kültüre edildi ve vitrifikasyon yöntemi kullanılarak donduruldu. Çözdürme sonrası ilk 24 saat boyunca embriyonik gelişim gözlendi. Kompakt morula oranı en yüksek SOF+FCS+Cys'de %20 ve CR1aa+FCS+Cys'de %19,4 olarak bulundu. SOF+FCS ve CR1aa+FCS'deki blastosist oranı sırasıyla %17,9 ve %15,4 olarak saptandı ve gruplar arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlıydı (P<0,05). En yüksek 12 saatlik canlılık değerlendirme oranı SOF+FCS'de (%47) belirlendi. Elde edilen sonuçlar, kullanılan kültür ortamının veya antioksidanın varlığına bakılmaksızın FCS'nin kompakt morula ve blastosiste ulaşmada olumlu bir etkiye sahip olduğunu göstermektedir. Çözdürme sonrası embriyonik gelişimleri arasında istatistiksel olarak bir fark yoktu.